Liberty Primary Author mixed material bibliography Bandung Program Pascasarjana Unpad 2014 id Indonesia

xv,;138 hlm,;29 cm Liberty. 2014. Analisis Ekspresi Cen Glu-I Dx5 Pada Padi Fatmawati Cenerasi T3 dan T4 serta Transformasi Gen Glu-1DylO Melalui Penembakan Partikel. Dibimbing oleh Murdaningsih Haeruman K., Nono Carsono, dan Tri Joko Santoso Analisis ekspresi gen Glu-fDx5 pada padi Fatmawati generasi T3 dan T4 serta transformasi gen Glu-l Dy l O melalui penembakan partikel dilakukan sebagai upaya perakitan kultivar padi unggul yang menghasilkan tepung dengan kualitas setara tepung gandum. Penelitian bertujuan untuk melihat stabilitas ekspresi gen Glu-I Dx5 pada padi transgenik kultivar Fatmawati generasi T 3 dan T4 dengan RT­ PCR. untuk mentransfer gen Glu- f Dy 1 () dan meregenerasikan eksplan hasil transformasi dan mendapatkan padi transgenik yang mengandung gen Glu- f Dy 10 dan terekspresi pada generasi T I berdasarkan karakter tinggi tanaman, panjang malai, panjang leher malai, posisi daun bendera, tipe malai, bentuk ligula dan warna ligula. Percobaan dilakukan pada bulan Februari 2010 sampai Februari2013 di (i) Laboratorium Genetic Engineering University of Tsukuba, Jepang, (ii) Laboratorium Biologi Molekuler BB-Biogen. Bogor, (iii) Laboratorium Analisis Tanaman Fakultas Pertanian Un pad, Jatinangor, dan Kebun Percobaan Fakultas Pertanian Unpad, Jatinangor. Penelitian ini dilakukan dalam tiga tahap kegiatan yang masing-masing terbagi ke dalam beberapa percobaan. Penelitian tahap pertama meliputi kegiatan (ijanalisis eksprcsi gen Glu-I D.t5 padi Fatmawati genersi T3 dengan RT-PCR, (ii ) deteksi gen Glu-I Dx5 padi Fauuawati genersi T4, dan (iii) analisis ekspresi gen Glu-I Dx5 padi Fatmawati genersi T; dengan RT­ PCR. Penclitian tahap kcduarncliputi kcgiatan (i ) pcngujian daya regcncrasi tiga genotip padi sccara III \ -it m. (1 i ) transformasi gen C; 1/1-1 Dv l () dengan penembakkan partikcl. clan (lli) deteksi molekuler gcn Glu-I IJ.I'/Opada generasi To. Pcnelitian tahap kctigarncliputi kcgiatan (i ) dctcksi molckulcr gcn Glu-lDyf() padapadi Kitaake generas i T". (i i) eval uasi karaktertanaman gCll G!l/-I Dy I () padi Kitaake generasi TI• dan (lii) analisis eksprcsi gen Glu-l Dvl O padi Kitaake generasi T I dengan RT-PCR. Berdasarkan analisis RT-PCR diperoleh tiga gaJur tanarnan padi kultivar Fatmawati generasi T, yang mcngekspresikan gen Glu-l Dx5 yang ditunjukkan dengan diperolehnya fragment produk peR yang sesuai dengan ukuran primer spesifik yang digunakan (365bp dan 815bp).Analisis yang sarna juga dilakukan pada generasi T 4dan hasilnya menunjukkan bahwa gen target dapat terekspresi dengan baik.Penelitiantahapkedua dilakukan untuk mengetahui daya regeneiasi kalus yang akan digunakan sebagai eksplan untuk transformasi. Pengujian daya regenerasi kalus menunjukkan bahwa tidak terdapat interaksi tiga fa or (genotip I x kosentrasi ZPT x induksi) pada semua karakter yang diamati. Kalus padi Kitaake yang diinduksi selama 7 hari dan Fatmawati selama 14 hari memberikan hasil terbaik pada ukuran kalus. Umumnya, tiga genotip padi yang diuji mampu beregenerasi membentuk tanaman, namun demikian genotip Kitaake memiliki penampilan terbaik. Penggunaan media ta~pa tambahan ZPT (2,4-D) dengan waktu induksi kalus 7 hari direkomendasikan untuk digunakan pada tahap induksi kalus. Hasil percobaan transformasi gen menunjukkan bahwa daya regenerasi yang tinggi diperoleh pada genotip Fatmawati dengan umur induksi 7 hari dan jarak tembak 7cm dan serta genotip Kitaake dengan umur induksi 7 hari dengan jarak tembak 9cm. Deteksi gen Glu-IDyIO yang dilakukan terhadap genotip Kitaake generasi To menunjukkan bahwa gen yang disisipkan dapat terdeteksi pada genom padi. Hal ini ditunjukkan dengan munculnya fragrnen produk PCR berukuran 662bp. Tujuh belas genotip padi Kitaake generasi T 1 diketahui mengandung gen Glu-IDyIO berdasarkan analisis PCR. Analisis terhadap karakter tanaman menunjukkan bahwa tanaman transgenik memiliki penampilan yang sama dengan genotip asalnya. Pengujian ekspresi gen pada 17 genotip transgenik generasi T\!)menunjukkan terdapat I galu adi yang mengekspresikan gen Glu-IDyIO. Hasil percobaan ini dapat menjadi dasar dalam pembentukan kultivar unggul padi yang mampu menghasilkan tepung dengan kualitas baik. Liberty daya regenerasi, ekspresi gen, Glu-IDx5, Glu-lDyIO 630 Lib A Perpustakaan Universitas Padjadjaran Kementerian Riset Teknologi dan Pendidikan Tinggi 630 Lib A/R.15.32 01001140100114 Perpustakaan Pusat (REF.15.32) 630 Lib A/R.15.32 20%252Fscan0001.jpg.jpg 14023 2017-04-01 16:03:52 2017-08-30 09:47:21 machine generated